Orfan la o vârstă fragedă, Peter Parker locuiește în Queens, New York, împreună cu mătușa sa dragă May și unchiul Ben. Peter duce viața unui elev normal, muncind ca fotograf la ziarul școlii, pândind-o pe frumoasa Mary Jane Watson și petrecând timpul cu prietenul Harry Osborn. În timpul unei excursii școlare, în timpul căreia Peter și colegii săi de clasă primesc o demonstrație științifică despre arahnide, Peter este mușcat de o păianjen modificat genetic. Puțin mai târziu, descoperă că are puteri neobișnuite: i se scapără forța și agilitatea unui păianjen, împreună cu un „spider-sense” ascuțit, similar ESP-ului. Peter își folosește inițial puterile pentru a face bani, dar în fața unei tragedii care lovește aproape de casă atunci când unchiul său Ben este omorât, jură să-și dedice viața combaterii crimei, luând la inimă cuvintele iubitei sale unchi Ben: „Cu putere mare vine o responsabilitate mare.” Între timp, omologul megalomaniac al industriei Norman Osborn, tatăl lui Harry, trece prin schimbări ale sale. O formulă experimentală a eşuat, crescând inteligența și forța lui, dar și făcându-l nebun. El este acum Green Goblin, inamicul principal al lui Spider-Man, care va pune la încercare jurământul tânărului Peter Parker de a lupta împotriva crimei și de a ajuta oamenii nevinovați.